動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

第一章 細(xì)胞培養(yǎng)概述
一、細(xì)胞培養(yǎng)發(fā)展簡史
二、細(xì)胞培養(yǎng)的基本概念
三、細(xì)胞培養(yǎng)實驗的基本要求
第二章 細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備技術(shù)
第一節(jié) 實驗器材清洗、包裝和消毒
一、常用的實驗器材
二、清洗
三、包裝
四、消毒
第二節(jié) 實驗室常用的儀器設(shè)備使用和維護
一、凈化臺
二、自動雙重純水蒸餾器
三、抽氣泵
四、壓力蒸汽消毒器
五、電熱恒溫培養(yǎng)箱
六、電熱恒溫干燥箱
七、液氮生物容器
八、C02培養(yǎng)箱
九、冰箱
第三節(jié) 動物細(xì)胞用液制備
一、蒸餾水
二、平衡鹽溶液
三、天然培養(yǎng)基
四、合成培養(yǎng)基
五、血清細(xì)胞培養(yǎng)基
六、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基
七、消化液
八、穩(wěn)定劑
九、蛋白酶抑制劑
十、pH調(diào)整液
十一、20 mmol／L L一谷氨酰胺
十二、抗菌素液
十三、細(xì)胞用液的分裝方法和要求
思考題
第三章 細(xì)胞培養(yǎng)基本技術(shù)
第一節(jié) 細(xì)胞原代培養(yǎng)
一、乳鼠肺組織原代培養(yǎng)程序
二、原代細(xì)胞實驗操作要領(lǐng)
三、原代細(xì)胞實驗注意事項
四、原代細(xì)胞實驗取材
五、原代細(xì)胞培養(yǎng)方法介紹
第二節(jié) 培養(yǎng)細(xì)胞的觀察
一、培養(yǎng)細(xì)胞分型
二、細(xì)胞培養(yǎng)中的常用術(shù)語
三、培養(yǎng)細(xì)胞一代生長過程
四、細(xì)胞周期
五、培養(yǎng)細(xì)胞的生命期
第三節(jié) 培養(yǎng)細(xì)胞常規(guī)檢查和生物學(xué)檢測
一、培養(yǎng)細(xì)胞常規(guī)檢查
二、培養(yǎng)細(xì)胞的生物學(xué)檢查和鑒定
第四節(jié) 細(xì)胞傳代培養(yǎng)
一、細(xì)胞傳代方法
二、乳鼠原代肺細(xì)胞培養(yǎng)物傳代
三、蓋玻片條細(xì)胞培養(yǎng)法
四、死、活細(xì)胞鑒別試驗
第五節(jié) 細(xì)胞凍存、復(fù)蘇、運輸和短期保存
一、影響凍存細(xì)胞活性的因素
二、細(xì)胞凍存方法
三、組織細(xì)胞短期保存方法
四、細(xì)胞復(fù)蘇方法
五、細(xì)胞運輸
六、引進(jìn)細(xì)胞的方法
思考題
第四章 細(xì)胞培養(yǎng)研究技術(shù)
第一節(jié) 細(xì)胞的分離和純化
一、成纖維細(xì)胞的分離和去除
二、骨髓和外周血有核細(xì)胞的純化
三、腫瘤細(xì)胞的分離純化
四、單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的純化
五、上皮細(xì)胞的純化
六、細(xì)胞移速分離純化
第二節(jié) 培養(yǎng)細(xì)胞活力檢測方法
一、細(xì)胞克隆形成試驗
二、細(xì)胞活性染色法
三、細(xì)胞四唑鹽比色法
第三節(jié) 細(xì)胞形態(tài)學(xué)研究方法
一、培養(yǎng)細(xì)胞的固定
二、培養(yǎng)細(xì)胞常用染色法
三、細(xì)胞免疫化學(xué)染色
四、培養(yǎng)細(xì)胞透射電鏡樣品的制備
五、培養(yǎng)細(xì)胞掃描電鏡樣品的制備
第四節(jié) 細(xì)胞遺傳學(xué)的檢測方法
一、細(xì)胞DNA定量的測定
二、細(xì)胞DNA合成的測定
三、細(xì)胞DNA雙參數(shù)的測定
四、人體外周血淋巴細(xì)胞染色體標(biāo)本的制備
五、培養(yǎng)細(xì)胞染色體標(biāo)本的制備
六、染色體G顯帶
七、姐妹染色單體區(qū)分染色法
第五節(jié) 顯微攝影技術(shù)
一、顯微鏡的光學(xué)部件和顯微照相操作
二、相差顯微鏡
三、熒光顯微鏡
第五章 原代細(xì)胞培養(yǎng)和分析
第一節(jié) SD乳鼠心肌細(xì)胞的分離培養(yǎng)
一、準(zhǔn)備
二、心肌細(xì)胞的分離培養(yǎng)
三、原代心肌細(xì)胞生長觀察
四、討論
第二節(jié) 大鼠血管平滑肌細(xì)胞的分離培養(yǎng)
一、準(zhǔn)備
二、取材
三、血管平滑肌細(xì)胞的分離培養(yǎng)
四、原代血管平滑肌細(xì)胞生長觀察
五、討論
第三節(jié) 成人前脂肪細(xì)胞的分離培養(yǎng)
一、準(zhǔn)備
二、前脂肪細(xì)胞的分離培養(yǎng)
三、原代前脂肪細(xì)胞生長觀察
四、討論
第四節(jié) 大鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞的分離培養(yǎng)
一、準(zhǔn)備
二、肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞的分離培養(yǎng)
三、原代肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長觀察
四、討論
附錄一 國內(nèi)外細(xì)胞庫
附錄二 動物常用的細(xì)胞注射技術(shù)
參考文獻(xiàn)