細胞培養(yǎng)技術(shù)

第一篇 動物細胞培養(yǎng)技術(shù)第一章 動物細胞培養(yǎng)概述 第一節(jié) 動物細胞培養(yǎng)的基本概念及其優(yōu)缺點 一、動物細胞培養(yǎng)的概念 二、動物細胞培養(yǎng)的優(yōu)缺點 第二節(jié) 動物細胞培養(yǎng)發(fā)展史 一、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)的創(chuàng)立 二、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展 第三節(jié) 動物細胞培養(yǎng)的應(yīng)用 一、在生物學領(lǐng)域的基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用 二、在臨床醫(yī)學上的應(yīng)用 三、在動物育種上的應(yīng)用 四、在生物制品生產(chǎn)上的應(yīng)用 第四節(jié) 動物細胞培養(yǎng)工作的基本要求和工作方法 一、動物細胞培養(yǎng)工作的基本要求 二、動物細胞培養(yǎng)工作方法 [理論難點自測] 實驗實訓項目 動物細胞培養(yǎng)的無菌操作第二章 動物細胞培養(yǎng)的基本知識 第一節(jié) 培養(yǎng)細胞的細胞生物學 一、培養(yǎng)細胞的生長類型和形態(tài)特征 二、培養(yǎng)細胞分化狀態(tài)的變化 三、培養(yǎng)細胞的生長特點 四、培養(yǎng)細胞的生長和增殖過程 第二節(jié) 培養(yǎng)細胞的生長條件 一、營養(yǎng)需要 二、生存環(huán)境 第三節(jié) 動物細胞培養(yǎng)實驗室 一、動物細胞培養(yǎng)實驗室的設(shè)置 二、動物細胞培養(yǎng)實驗室的設(shè)備 三、動物細胞培養(yǎng)實驗室常用器具 [理論難點自測] 實驗實訓項目 動物細胞培養(yǎng)常用設(shè)備的使用第三章 動物細胞培養(yǎng)的準備工作 第一節(jié) 培養(yǎng)用品的清洗、包裝和滅菌 一、培養(yǎng)用品的清洗 二、培養(yǎng)用品的包裝 三、培養(yǎng)用品的消毒滅菌 第二節(jié) 動物細胞培養(yǎng)用液的類型、配制和無菌處理 一、平衡鹽溶液 二、消化液 三、天然培養(yǎng)基 四、合成培養(yǎng)基 五、完全培養(yǎng)基 六、無血清培養(yǎng)基 七、其他常用液 [理論難點自測] 實驗實訓項目一 動物細胞培養(yǎng)實驗器具的清洗、包裝和滅菌 實驗實訓項目二 幾種動物細胞培養(yǎng)用液的配制和無菌處理第四章 動物細胞培養(yǎng)的基本技術(shù)和方法 第一節(jié) 培養(yǎng)細胞的取材與分離 一、培養(yǎng)細胞的取材 二、組織材料的分離 第二節(jié) 動物細胞的原代培養(yǎng)技術(shù) 一、組織塊培養(yǎng)法 二、消化培養(yǎng)法 第三節(jié) 培養(yǎng)細胞的觀察和檢測技術(shù) 一、培養(yǎng)細胞的常規(guī)觀察 二、細胞生長曲線的測定 三、細胞培養(yǎng)的污染檢測及其排除 第四節(jié) 動物細胞傳代培養(yǎng)技術(shù) 一、原代培養(yǎng)的首次傳代 二、細胞傳代方法 三、細胞系的維持 第五節(jié) 細胞的凍存、復蘇和運輸技術(shù) 一、細胞的凍存 二、細胞的復蘇 三、細胞的運輸 [理論難點自測] 實驗實訓項目一 細胞計數(shù)及密度換算 實驗實訓項目二 小鼠胎兒細胞的原代培養(yǎng)(組織塊培養(yǎng)法) 實驗實訓項目三 雞胚原代細胞的培養(yǎng)(消化培養(yǎng)法) 實驗實訓項目四 培養(yǎng)細胞的觀察 實驗實訓項目五 細胞活性檢查 實驗實訓項目六 原代培養(yǎng)細胞的傳代 實驗實訓項目七 細胞凍存技術(shù) 實驗實訓項目八 細胞的常規(guī)復蘇技術(shù)第五章 動物細胞的大規(guī)模培養(yǎng) 第一節(jié) 動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)概述 一、動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)的概念 二、動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用 三、動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)的一般工藝流程 第二節(jié) 動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)的方法和操作方式 一、動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)的方法 二、大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)的操作方式 第三節(jié) 動物細胞生物反應(yīng)器 一、攪拌罐式生物反應(yīng)器 二、氣升式生物反應(yīng)器 三、中空纖維生物反應(yīng)器 四、其他生物反應(yīng)器 [理論難點自測] 實驗實訓項目一 Vero細胞的微載體培養(yǎng) 實驗實訓項目二 動物細胞生物反應(yīng)器的使用或參觀第六章 特殊細胞培養(yǎng)概要 第一節(jié) 正常組織細胞的培養(yǎng) 一、上皮細胞培養(yǎng) 二、神經(jīng)細胞培養(yǎng) 第二節(jié) 腫瘤細胞培養(yǎng) 一、體外培養(yǎng)腫瘤細胞的生物學特性 二、腫瘤細胞的培養(yǎng)要點 [理論難點自測] 實驗實訓項目一 異體動物接種成瘤實驗 實驗實訓項目二 腫瘤細胞的軟瓊脂集落實驗第七章 與動物細胞培養(yǎng)相關(guān)的部分實驗技術(shù) 第一節(jié) 單克隆抗體的制備 一、單克隆抗體的概念 二、雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體的基本原理 三、雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體的主要過程 四、制備單克隆抗體可能出現(xiàn)的主要問題 第二節(jié) 細胞的基因轉(zhuǎn)染技術(shù) 一、待轉(zhuǎn)染細胞的準備 二、常用的細胞轉(zhuǎn)染方法 [理論難點自測] 實驗實訓項目一 細胞融合 實驗實訓項目二 細胞克隆第二篇 植物細胞培養(yǎng)技術(shù)第八章 植物細胞培養(yǎng)概論 第一節(jié) 植物組織與細胞培養(yǎng) 一、植物組織培養(yǎng) 二、植物細胞培養(yǎng) 第二節(jié) 植物細胞培養(yǎng)的發(fā)展史 一、植物細胞培養(yǎng)的創(chuàng)立階段 二、植物細胞培養(yǎng)的發(fā)展階段 三、植物細胞培養(yǎng)的應(yīng)用研究階段 第三節(jié) 植物細胞培養(yǎng)的應(yīng)用 一、在植物育種方面的應(yīng)用 二、在植物脫毒方面的應(yīng)用 三、在離體快繁方面的應(yīng)用 四、在植物種質(zhì)資源保存方面的應(yīng)用 [理論難點自測] 實驗實訓項目 植物細胞培養(yǎng)無菌操作訓練第九章 植物細胞培養(yǎng)的條件 第一節(jié) 植物細胞培養(yǎng)的實驗室條件 一、植物細胞培養(yǎng)實驗室的設(shè)計 二、植物細胞培養(yǎng)實驗室的儀器和設(shè)備 三、植物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)器具 第二節(jié) 植物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基 一、培養(yǎng)基的組成 二、常用的植物細胞培養(yǎng)基種類 三、植物細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基配制 第三節(jié) 植物細胞培養(yǎng)的環(huán)境條件 一、溫度 二、濕度 三、光照 四、氣體 五、pH [理論難點自測] 實驗實訓項目一 植物組織細胞培養(yǎng)基母液的配制和保存 實驗實訓項目二 植物組織細胞培養(yǎng)基的配制和滅菌 實驗實訓項目三 植物細胞培養(yǎng)常用設(shè)備的使用第十章 植物細胞培養(yǎng)的基本過程和方法 第一節(jié) 植物細胞的獲取 一、從外植體直接分離植物細胞 二、通過愈傷組織誘導獲取植物細胞” 第二節(jié) 植物細胞的懸浮培養(yǎng) 一、懸浮細胞的誘導 二、懸浮培養(yǎng)細胞的生長和測定 三、懸浮培養(yǎng)細胞的同步化 第三節(jié) 植物細胞的固定化培養(yǎng) 一、植物細胞固定化的方法 二、固定化植物細胞的培養(yǎng)方法 第四節(jié) 單細胞培養(yǎng) 一、植物單細胞的制備 二、植物單細胞的培養(yǎng) 三、影響植物單細胞培養(yǎng)的因素 第五節(jié) 原生質(zhì)體培養(yǎng) 一、植物原生質(zhì)體的特點 二、植物原生質(zhì)體的制備 三、植物原生質(zhì)體的培養(yǎng)方法 [理論難點自測] 實驗實訓項目一 胡蘿卜和白菜成熟胚愈傷組織培養(yǎng) 實驗實訓項目二 植物細胞懸浮培養(yǎng)第十一章 植物細胞的大規(guī)模培養(yǎng) 第一節(jié) 植物細胞大規(guī)模培養(yǎng)概述 一、植物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)的概念 二、植物細胞大規(guī)模培養(yǎng)的應(yīng)用和工業(yè)前景 三、植物細胞大規(guī)模培養(yǎng)流程 第二節(jié) 植物細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù) 一、植物細胞規(guī)?；囵B(yǎng)體系的建立 二、植物細胞的大規(guī)模培養(yǎng)方法 第三節(jié) 植物細胞生物反應(yīng)器 一、攪拌式生物反應(yīng)器 二、非攪拌式生物反應(yīng)器 三、植物細胞固定化培養(yǎng)生物反應(yīng)器 [理論難點自測] 實驗實訓項目 種子細胞篩選與細胞規(guī)?；囵B(yǎng)附錄 細胞培養(yǎng)技術(shù)常用術(shù)語中英文對照參考文獻