生物化學與分子生物學實驗教程

第一章　核酸提取
第一節(jié)　基因組DNA的制備
一、制備植物細胞基因組DNA
二、制備動物細胞基因組DNA
三、制備細菌基因組DNA
四、制備酵母基因組DNA（以Pichia pastoris基因組DNA提取為例）
五、結果分析
六、基因組DNA提取注意事項
第二節(jié)　RNA的制備
一、動物物RNA提取（以人臍帶組織總RNA的抽提為例）
二、植物RNA的分離
三、綠色葉片植物葉線粒體RNA的分離
四、酵母RNA分離
五、酵母tRNA制備（苯酚法）
六、細菌RNA分離
七、結果分析
第三節(jié)　質粒DNA制備
一、大腸桿菌質粒DNA制備（堿裂解法）
二、農(nóng)桿菌質粒DNA提取
三、結果分析
第二章　cDNA文庫構建
第一節(jié)　應用常規(guī)方法構建cDNA文庫
一、原理
二、cDNA第一條鏈的合成
三、cDNA第二條鏈的合成
四、補平cDNA鏈末端
五、cDNA甲基化
六、cDNA與接頭或銜接子相連接
七、凝膠過濾分離cDNA
八、cDNA與入噬菌體臂的連接
九、重組子的篩選與鑒定
　第二節(jié)　構建cDNA文庫新方法
　一、減數(shù)cDNA文庫
二、標準化cDNA文庫
第三節(jié)　cDNA文庫構建及應用實例
一、主要材料
二、實驗操作要點
三、結果及分析
第三章 已知目標DNA片段的獲取
第一節(jié)　PCR法擴增目標DNA片段
一、原理
二、PCR條件
三、引物設計原則
四、PCR反應特點
五、試劑
六、溫度與時間的設置
七、PCR擴增效果的檢查
八、注意事項
九、用PCR擴增目標基因實例
十、PCR技術擴展
　第二節(jié)　基因的化學合成
一、磷酸二酯法
二、磷酸三酯法
三、固相亞磷酸三酯法
四、用寡核苷酸片段組裝
第四章 已知部分序列的DNA片段的獲取
第一節(jié) RACE
一、5’RACE
二、3’RACE
三、RACE方案的PCR優(yōu)化
四、RACE應用實例
第二節(jié)　染色體步移
一、原理
二、材料
三、實驗操作
第三節(jié)　反向PCR
一、原理
二、材料
三、實驗操作
四、反向PCR應用實例
第四節(jié)　錨定PCR
一、原理
　……
第五章　未知DNA片段的獲取　
第六章　RNAi技術
第七章　DNA重組
第八章　生產(chǎn)重組蛋白
第九章　純化技術
第十章　電泳技術
第十一章　雜交技術
第十二章　生物質譜技術
第十三章　生物芯片
第十四章　噬菌體展示技術
第十五章　生命大分子相互作用分析
第十六章　生物信息學概況及生物信息數(shù)據(jù)庫