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內(nèi)容簡介

　　《分子生物學實驗》首先對分子生物學實驗原理與技術(shù)進行了概括性介紹。在此基礎(chǔ)上，對分子生物學實驗的基本技術(shù)與方法，包括對來自動植物、微生物細胞的DNA和RNA樣品的制備、克隆和表達載體的制備、重組質(zhì)粒的構(gòu)建、重組DNA導入各種受體細胞、外源基因的表達和重組子的鑒定、用酵母表達系統(tǒng)克隆和表達基因、絲狀真菌遺傳轉(zhuǎn)化系統(tǒng)的基本操作、各種PCR技術(shù)原理與應用、工程菌的培養(yǎng)與目標產(chǎn)物的分離等多方面進行了闡述。每章均在詳細介紹相關(guān)實驗技術(shù)基本原理的基礎(chǔ)上，將基礎(chǔ)性實驗內(nèi)容和部分提高、創(chuàng)新性實驗內(nèi)容的操作過程詳細列出，以訓練和提升學生和其他相關(guān)研究人員的分子生物學實驗技能。《分子生物學實驗》10章共涵蓋40個實驗，可供不同需求人員選用。在重點介紹通用的大腸桿菌分子生物學實驗技術(shù)的基礎(chǔ)上，《分子生物學實驗》對近年來發(fā)展迅速的酵母和絲狀真菌分子生物學實驗技術(shù)作了較系統(tǒng)的介紹，希望對從事相關(guān)內(nèi)容科研的研究生和科研人員有所裨益?！斗肿由飳W實驗》可作為高等學校生物學科各專業(yè)本科生和研究生的分手生物學實驗指導教材，同時對從事相關(guān)領(lǐng)域的教學、科研人員來說也是一本有益的參考書。

作者簡介

暫缺《分子生物學實驗》作者簡介

圖書目錄

第1章分子生物學實驗原理與技術(shù)概述
第2章染色體DNA和RNA的制備
實驗2.1 細菌染色體DNA的提取
實驗2.2 酵母染色體DNA的提取
實驗2.3 SDS裂解法提取絲狀真菌染色體DNA
實驗2.4 RNA的提取
實驗2、5 凝膠電泳進行DNA分離純化
實驗2.6 核酸純度、濃度與相對分子質(zhì)量的測定
第3章載體的制備
實驗3.1 質(zhì)粒DNA的提取——堿變性提取法
實驗3.2 λ噬菌體DNA的提取
實驗3.3 λDNA去磷酸化臂的制備
第4章重組質(zhì)粒的構(gòu)建
實驗4.1 限制性核酸內(nèi)切酶的酶切反應
實驗4.2 酶切DNA片段的CIP處理
實驗4.3 酶切DNA片段的分離與回收
實驗4.4 載體與外源DNA的連接反應
第5章重組DNA導入受體細胞
實驗5.1 感受態(tài)細胞的制備及質(zhì)粒轉(zhuǎn)化
實驗5.2 λ噬菌體載體與外源DNA片段的連接、體外包裝與擴增（基因組文庫的構(gòu)建）
第6章重組子的鑒定和外源基因的表達
實驗6.1 E.coli轉(zhuǎn)化子的篩選與驗證
實驗6.2 Southern印跡雜交
實驗6.3 Northern印跡雜交
實驗6.4 斑點印跡雜交
實驗6.5 外源基因的誘導表達
實驗6.6 變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測重組蛋白的表達
實驗6.7 Western印跡技術(shù)檢測重組蛋白的表達
第7章在釀酒酵母中克隆表達外源基因
實驗7.1 酵母染色體DNA的提取
實驗7.2 木糖還原酶基因的獲得
實驗7.3 重組質(zhì)粒的構(gòu)建（酶切連接）
實驗7.4 酵母質(zhì)粒的小量提取與插人方向驗證
實驗7.5酵母菌LiAc完整轉(zhuǎn)化酵母細胞
實驗7.6釀酒酵母轉(zhuǎn)化子的驗證
實驗7.7重組酵母木糖還原酶活性的測定
實驗7.8重組酵母菌株發(fā)酵實驗及發(fā)酵產(chǎn)物分析
第8章絲狀真菌的轉(zhuǎn)化與轉(zhuǎn)化子的篩選
實驗8.1 瑞氏木霉原生質(zhì)體的制備與轉(zhuǎn)化實驗
實驗8.2 瑞氏木霉原生質(zhì)體電轉(zhuǎn)化實驗
實驗8.3 農(nóng)桿菌介導的瑞氏木霉轉(zhuǎn)化
實驗8.4 振蕩破壁法快速小量提取瑞氏木霉染色體DNA
實驗8.5 瑞氏木霉潮霉素抗性轉(zhuǎn)化子的PCR鑒定
第9章 PCR技術(shù)原理與應用
實驗9.1 PCR擴增目的片段
實驗9.2 一步法RT—PCR
實驗9.3 兩步法RT—PCR
第10章工程菌的培養(yǎng)與目標產(chǎn)物的分離
實驗10.1 重組E.coli誘導表達外源內(nèi)切B-1，4-葡聚糖酶
實驗10.2 從E.coli中提取純化目的重組蛋白
附錄