微囊藻毒素分析檢測(cè)技術(shù)

第一章 水體富營養(yǎng)化與藍(lán)藻水華1
第一節(jié) 藍(lán)藻概述1
第二節(jié) 水體富營養(yǎng)化2
一、水體富營養(yǎng)化的概念2
二、富營養(yǎng)化的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)3
三、富營養(yǎng)化水體的特征4
四、富營養(yǎng)化的產(chǎn)生機(jī)理5
五、水體富營養(yǎng)化的危害6
六、水體富營養(yǎng)化與藍(lán)藻水華9
七、富營養(yǎng)化研究的意義與展望10
第三節(jié) 藍(lán)藻水華的污染現(xiàn)狀10
第四節(jié) 藍(lán)藻毒素的種類、結(jié)構(gòu)及毒性機(jī)理11
一、藍(lán)藻神經(jīng)毒素12
二、藍(lán)藻肝毒素13
三、其他毒素15
主要參考文獻(xiàn)15
第二章 微囊藻毒素概述17
第一節(jié) 微囊藻毒素簡介17
一、概述17
二、微囊藻毒素的結(jié)構(gòu)18
三、微囊藻毒素的理化性質(zhì)19
第二節(jié) 微囊藻毒素的產(chǎn)生、分布和變遷21
一、微囊藻毒素的產(chǎn)生機(jī)制21
二、微囊藻毒素的分布23
三、微囊藻毒素在水體中的遷移24
第三節(jié) 微囊藻毒素和環(huán)境因子之間的關(guān)系25
一、光照對(duì)微囊藻毒素的影響25
二、溫度對(duì)微囊藻毒素的影響26
三、不同形態(tài)氮對(duì)微囊藻毒素的影響26
四、不同形態(tài)磷對(duì)微囊藻毒素的影響26
五、痕量金屬對(duì)微囊藻毒素的影響27
第四節(jié) 微囊藻毒素對(duì)水環(huán)境的影響27
一、微囊藻毒素對(duì)水生細(xì)菌的影響27
二、微囊藻毒素對(duì)浮游動(dòng)物的影響27
三、微囊藻毒素對(duì)底棲動(dòng)物的影響28
第五節(jié) 微囊藻毒素的污染現(xiàn)狀29
一、歐洲水體微囊藻毒素的情況29
二、美洲水體微囊藻毒素的情況30
三、亞洲水體微囊藻毒素的情況30
四、我國淡水水體微囊藻毒素的情況31
第六節(jié) 微囊藻毒素的危害和毒性機(jī)理32
一、MC.LR對(duì)動(dòng)植物的危害32
二、MC.LR對(duì)人類健康的危害33
三、MC的毒性機(jī)理33
第七節(jié) 微囊藻毒素的穩(wěn)定性和去除方法34
一、微囊藻毒素的一般穩(wěn)定性和去除研究34
二、化學(xué)方法對(duì)微囊藻毒素的分解和去除34
三、生物法對(duì)微囊藻毒素的分解和去除37
四、物理方法對(duì)微囊藻毒素的去除39
第八節(jié) 微囊藻毒素標(biāo)準(zhǔn)制訂41
主要參考文獻(xiàn)42
第三章 微囊藻毒素的提取分離技術(shù)47
第一節(jié) 原材料的來源47
一、自然水域藍(lán)藻水華47
二、實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)產(chǎn)毒銅綠微囊藻48
第二節(jié) 提取方法48
一、細(xì)胞破碎48
二、提取方式的選擇49
三、提取溶劑的選擇50
第三節(jié) 分離技術(shù)51
一、色譜分離技術(shù)51
實(shí)例3.1 微囊藻毒素的提取和提純研究55
實(shí)例3.2 大孔吸附樹脂分離純化微囊藻毒素55
實(shí)例3.3 薄層色譜法檢測(cè)藍(lán)藻和天然水中微囊藻毒素56
二、過濾與膜分離技術(shù)58
實(shí)例3.4 超濾膜去除微囊藻毒素.LR的機(jī)理和影響因素研究59
三、超臨界流體萃取技術(shù)60
實(shí)例3.5 超臨界流體萃取藍(lán)藻中的微囊藻毒素61
第四節(jié) 樣品的保存61
第五節(jié) 純度鑒定62
主要參考文獻(xiàn)63
第四章 微囊藻毒素的化學(xué)分析檢測(cè)方法65
第一節(jié) 樣品的采集與前處理65
一、樣品采集65
二、樣品的前處理68
實(shí)例4.1 水樣的富集和洗脫71
實(shí)例4.2 藍(lán)藻及動(dòng)物樣品的富集和凈化71
第二節(jié) 高效液相色譜法72
一、液相色譜分析條件的選擇72
二、檢測(cè)器的選擇73
三、MC的液相色譜定性定量分析74
實(shí)例4.3 水中微囊藻毒素的液相色譜分析75
實(shí)例4.4 螺及魚體內(nèi)MC的液相色譜分析76
第三節(jié) 液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用分析法77
一、液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)概述77
二、MC的液相色譜.質(zhì)譜聯(lián)用定性定量分析78
實(shí)例4.5 高效液相色譜.質(zhì)譜聯(lián)用方法測(cè)定背角無齒蚌體內(nèi)微囊藻毒素79
實(shí)例4.6 超高效液相色譜.飛行時(shí)間質(zhì)譜快速檢測(cè)飲用水及藻類制品中的微囊藻毒素81
實(shí)例4.7 水樣中MC的LC.MS/MS法檢測(cè)81
第四節(jié) 氣相色譜法86
一、氣相色譜技術(shù)概述86
二、MC的氣相色譜法定性定量分析86
實(shí)例4.8 用MMPB法分析沉淀物中的MC87
第五節(jié) 薄層色譜法88
一、薄層色譜法概述88
二、MC的薄層色譜法分析89
第六節(jié) 毛細(xì)管電泳法89
一、毛細(xì)管電泳法概述89
二、MC的毛細(xì)管電泳法分析89
第七節(jié) 其他化學(xué)分析方法90
一、極譜伏安分析90
二、紅外法91
三、核磁共振法92
主要參考文獻(xiàn)93
第五章 微囊藻毒素的生物檢測(cè)方法96
第一節(jié) 小鼠法96
第二節(jié) 鹽水蝦法97
實(shí)例5.1 藻毒素的鹽水蝦法分析97
第三節(jié) 發(fā)光細(xì)菌法99
一、原理99
二、發(fā)展99
三、檢測(cè)實(shí)例100
實(shí)例5.2 水產(chǎn)品中藻毒素的發(fā)光細(xì)菌法分析100
第四節(jié) 其他生物方法103
一、動(dòng)物法103
二、植物法103
主要參考文獻(xiàn)104
第六章 微囊藻毒素的生物化學(xué)分析檢測(cè)方法105
第一節(jié) 蛋白磷酸酶抑制分析法105
一、原理與分類105
二、特點(diǎn)105
三、微囊藻毒素的蛋白磷酸酶抑制分析法106
實(shí)例6.1 蛋白磷酸酶抑制法——熒光法檢測(cè)微囊藻毒素的影響因素研究108
第二節(jié) 2.甲基.3.甲氧基.4.苯基丁酸法109
一、原理109
二、方法的發(fā)展與改進(jìn)110
三、特點(diǎn)110
四、最新研究進(jìn)展與應(yīng)用111
第三節(jié) 蛋白磷酸酯酶競爭性結(jié)合法112
第四節(jié) 組織培養(yǎng)細(xì)胞毒性法112
第五節(jié) 其他生物化學(xué)方法113
主要參考文獻(xiàn)113
第七章 微囊藻毒素的分子生物學(xué)檢測(cè)方法115
第一節(jié) 全細(xì)胞聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)法115
一、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的發(fā)展115
二、原理116
三、PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件117
四、PCR反應(yīng)特點(diǎn)120
五、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物分析120
六、微囊藻毒素的全細(xì)胞PCR分析法120
實(shí)例7.1 微囊藻毒素合成酶基因的PCR檢測(cè)方法123
第二節(jié) 實(shí)時(shí)定量PCR法125
一、實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)原理與特點(diǎn)125
二、實(shí)時(shí)定量PCR研究進(jìn)展125
三、微囊藻毒素的實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)法129
第三節(jié) 生物傳感器129
主要參考文獻(xiàn)130
第八章 微囊藻毒素的免疫學(xué)檢測(cè)方法133
第一節(jié) 酶聯(lián)免疫吸附分析法133
一、酶聯(lián)免疫吸附分析法概述133
二、微囊藻毒素.LR完全抗原的制備及鑒定134
三、微囊藻毒素.LR抗體的制備與鑒定137
四、微囊藻毒素.LR高靈敏ELISA檢測(cè)方法的建立141
五、微囊藻毒素.LR高靈敏ELISA酶免試劑盒的研制143
第二節(jié) 膠體金免疫色譜法147
一、膠體金免疫檢測(cè)技術(shù)概述147
二、微囊藻毒素.LR單抗膠體金結(jié)合物的制備及鑒定150
三、微囊藻毒素.LR“金標(biāo)”試紙條的研制及驗(yàn)證153
第三節(jié) 微囊藻毒素的放射免疫分析法157
一、基本原理157
二、標(biāo)記技術(shù)158
三、放射免疫分析實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)及常見問題162
四、微囊藻毒素的放射免疫檢測(cè)164
第四節(jié) 微囊藻毒素的時(shí)間分辨熒光免疫分析168
一、時(shí)間分辨熒光免疫分析介紹168
二、時(shí)間分辨熒光免疫分析方法的建立172
三、時(shí)間分辨熒光免疫分析的注意事項(xiàng)181
四、微囊藻毒素時(shí)間分辨熒光免疫分析的方法182
實(shí)例8.1 微囊藻毒素直接競爭時(shí)間分辨熒光免疫分析法182
實(shí)例8.2 微囊藻毒素間接競爭時(shí)間分辨熒光免疫分析法184
第五節(jié) 免疫親和色譜法185
一、原理185
二、特點(diǎn)187
三、分類187
四、親和吸附劑188
五、親和色譜的基本操作193
六、免疫親和色譜柱的工作原理195
七、微囊藻毒素.LR免疫親和色譜柱的研制196
實(shí)例8.3 水中微囊藻毒素.LR的免疫親和色譜.高效液相法檢測(cè)199
實(shí)例8.4 藻樣中微囊藻毒素的免疫親和色譜.液質(zhì)聯(lián)用法檢測(cè)204
第六節(jié) 免疫傳感器法209
一、原理、特點(diǎn)與分類209
二、免疫傳感器的固定方法211
三、檢測(cè)步驟213
四、免疫傳感器在藻毒素檢測(cè)中的應(yīng)用進(jìn)展214
實(shí)例8.5 藻樣中微囊藻毒素的免疫傳感器檢測(cè)214
主要參考文獻(xiàn)219
第九章 展望222附錄225
附錄一主要縮略語表225
附錄二藍(lán)藻水華照片227