生物文庫技術(shù)：噬菌體展示與SELEX技術(shù)

定　價：￥28.00

作　者：	邵寧生，楊光，房濤主編
出版社：	軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)出版社
叢編項：
標(biāo)　簽：	微生物學(xué)

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ISBN：	9787802450691	出版時間：	2011-10-01	包裝：	平裝
開本：	16開	頁數(shù)：	144	字?jǐn)?shù)：

內(nèi)容簡介

　　噬菌體展示技術(shù)和SELEX技術(shù)是生物文庫技術(shù)中最常用的兩種技術(shù)。噬菌體展示技術(shù)是將外源蛋白的基因型與表型聯(lián)系在一起，通過篩選可以將展示特異性外源蛋白多肽的噬菌體從表達(dá)有各種外源蛋白的噬菌體庫中篩選出來，經(jīng)擴(kuò)增可以得到上千倍乃至108倍的富集。獲得的靶（分）子特異結(jié)合肽在拮抗肽篩選、抗體抗原表位鑒定方面十分有用。SELEX技術(shù)是應(yīng)用大容量的人工合成隨機(jī)寡核苷酸庫，結(jié)合PCR體外擴(kuò)增技術(shù)，以指數(shù)級富集與靶（分）子特異結(jié)合的寡核苷酸適配體（aptamer）的方法。由于獲得的aptamer具有高特異性、高親和力，在特異分子標(biāo)志物篩選及靶標(biāo)發(fā)現(xiàn)方面具有獨到優(yōu)勢。目前，噬菌體展示和SELEX技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)研究、藥物篩選、疫苗及診斷試劑的研制等方面，具有很好的應(yīng)用前景?！渡镂膸旒夹g(shù)：噬菌體展示與SELEX技術(shù)》作者經(jīng)過多年努力，建立和改良了多種噬菌體展示和SELEX技術(shù)平臺，并利用上述技術(shù)平臺開展了針對感染、炎癥、腫瘤和生物毒素等方面的新型診斷或治療藥物以及基礎(chǔ)方面的研究，取得了良好的結(jié)果。此書是根據(jù)作者實際工作經(jīng)驗，結(jié)合具體篩選實例編寫而成，特別編入作者的經(jīng)驗借鑒與注意事項，為讀者提供了較詳盡的參考技術(shù)路線和具體操作方法，盡量使具有一定生物化學(xué)和分子生物學(xué)實驗基礎(chǔ)的科技人員能夠快速掌握噬茵體展示和SELEX技術(shù)。

作者簡介

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圖書目錄

上篇噬菌體表面展示技術(shù)原理及其操作指南
　第1章概述
　一、噬菌體表面展示隨機(jī)肽庫
　二、噬菌體抗體庫
　三、噬菌體表面展示技術(shù)篩選原理和基本方法
　四、噬菌體表面展示技術(shù)的應(yīng)用
　第2章噬菌體表面展示肽庫技術(shù)操作指南
　一、試劑
　二、實驗步驟
　三、影響篩選的因素
　四、結(jié)果判斷和分析
　第3章噬菌體肽庫構(gòu)建及篩選實例
　實例1 基于昆蟲防御素A蛋白分子的噬菌體展示構(gòu)象肽庫的構(gòu)建
　實例2 重組hTNF-α結(jié)合肽的篩選
　實例3 馬抗SARS-CoV多抗抗原表位的篩選
　第4章噬菌體抗體庫技術(shù)操作指南
　一、試劑
　二、實驗步驟
　三、影響篩選的因素
　第5章噬菌體抗體庫構(gòu)建及篩選實例
　一、引物
　二、淋巴細(xì)胞總RNA的提取及VH和VL基因的擴(kuò)增
　三、初級噬菌體抗體庫的構(gòu)建
　四、通過Cre-loxP位點特異性重組構(gòu)建大容量噬菌體抗體庫
　五、噬菌體抗體庫的篩選
　六、噬菌體抗體的鑒定及序列分析
下篇 SELEX技術(shù)原理及其操作指南
　第1章概述
　一、SELEX技術(shù)的基本技術(shù)路線
　二、SELEX篩選的特點
　三、SELEX的應(yīng)用
　四、適配子的改造
　第2章 SELEX技術(shù)操作指南
　一、試劑與設(shè)備
　二、文庫/文庫模板和引物的設(shè)計與合成
　三、RNA文庫的獲得（PCR、體外轉(zhuǎn)錄與RNA回收）
　四、文庫與靶分子孵育
　五、結(jié)合寡核苷酸分子的分離
　六、反轉(zhuǎn)錄
　七、PCR
　八、下一輪篩選用文庫的制備
　九、重復(fù)篩選
　十、篩選后獲得的特異aptamer的分析
　第3章 SELEX技術(shù)篩選實例
　實例1 牛凝血酶特異的RNA aptamer的篩選
　實例2 CE-SELEX篩選技術(shù)
　實例3 親和層析SELEX篩選促紅細(xì)胞生成素適配體及基于分子信標(biāo)檢測方法的建立
　實例4 親和層析SELEX篩選相思子毒素適配體及其在分析檢測中的應(yīng)用
　實例5 以完整細(xì)胞為靶的消減SELEX篩選
　實例6 腫瘤組織切片-SELEX技術(shù)篩選臨床標(biāo)本分子探針
　實例7 組合aptamer用于金黃色葡萄球菌檢測的研究