《傳染性法氏囊病毒的反向遺傳操作研究》簡介:本研究克隆了IBDV B87株的全基因組,并對其基因組進行了詳細的生物信息學分析,結果發(fā)現了一些針對不同強弱毒力的毒株而呈規(guī)律性變化的氨基酸位點,同時,發(fā)現VP2僅是決定IBDV毒力的因素之一。B節(jié)段在系統(tǒng)發(fā)育中要比A節(jié)段相對保守。結合計算機軟件在A、B節(jié)段基因組上分別各找到一個沉默突變位點,通過PCR的方法進行沉默突變,獲得了帶有遺傳標志的A、B基因組全長載體。在此基礎上構建了A、B基因組5’帶有T7轉錄子基因的體外轉錄載體和帶有綠色熒光蛋白的體內轉錄真核表達載體。將體外轉錄載體轉錄的RNA與體內轉錄載體分別和脂質體共轉染Vero細胞,經多次傳代“拯救”出帶有遺傳標記的IBD病毒。