雙光子熒光探針及其顯微成像

第一章 雙光子熒光成像的概述
1.1 雙光子熒光成像的概念
1.1.1 現(xiàn)代分析方法
1.1.2 雙光子熒光成像技術(shù)
1.2 雙光子熒光成像的特點(diǎn)和發(fā)展簡史
1.2.1 雙光子熒光成像的特點(diǎn)
1.2.2 雙光子吸收的概念
1.2.3 雙光子熒光檢測的特點(diǎn)
1.2.4 雙光子顯微成像的發(fā)展簡史
1.3 雙光子熒光成像的應(yīng)用
1.4 雙光子熒光檢測的發(fā)展趨勢
1.5 參考文獻(xiàn)

第二章 雙光子熒光成像理論
2.1 熒光顯微鏡
2.1.1 熒光顯微鏡的特殊結(jié)構(gòu)
2.1.2 熒光顯微鏡的要求
2.1.3 熒光顯微鏡的類別
2.2 雙光子熒光成像
2.2.1 雙光子激發(fā)概述
2.2.2 雙光子熒光共焦顯微成像
2.2.3 雙光子熒光強(qiáng)度的空間分布
2.2.4 雙光子熒光成像的原理
2.2.5 雙光子熒光共聚焦顯微鏡的成像理論
2.3 雙光子熒光顯微鏡的光學(xué)特點(diǎn)
2.3.1 雙光子熒光顯微鏡的光學(xué)特點(diǎn)
2.3.2 雙光子吸光材料的特點(diǎn)
2.3.3 雙光子熒光顯微鏡的優(yōu)點(diǎn)及存在問題
2.4 參考文獻(xiàn)

第三章 雙光子熒光成像設(shè)備
3.1 概述
3.1.1 雙光子熒光顯微鏡的特殊要求
3.1.2 透射式和落射式熒光顯微鏡
3.2 雙光子共焦熒光顯微鏡結(jié)構(gòu)
3.2.1 共焦熒光顯微鏡配制及原理
3.2.2 雙光子熒光顯微成像優(yōu)點(diǎn)及缺點(diǎn)
3.3 常見雙光子熒光顯微鏡的特點(diǎn)
3.3.1 LaVision BioTec的雙光子顯微鏡
3.3.2 萊卡（Leica）雙光子熒光顯微鏡
3.3.3 蔡司（Zeiss）雙光子熒光顯微鏡
3.3.4 奧林巴斯（Olympus）雙光子熒光顯微鏡
3.3.5 百樂（Bio-Rad）雙光子熒光顯微鏡
3.3.6 Nikon A1RMP雙光子顯微鏡
3.4 雙光子熒光顯微鏡的操作
3.4.1 系統(tǒng)的使用
3.4.2 軟件的快速使用說明
3.4.3 關(guān)機(jī)順序
3.4.4 系統(tǒng)的維護(hù)
3.5 參考文獻(xiàn)

第四章 細(xì)胞和組織的雙光子熒光成像
4.1 細(xì)胞培養(yǎng)的基本知識(shí)
4.1.1 基本概念
4.1.2 細(xì)胞培養(yǎng)的無菌環(huán)境
4.1.3 常用培養(yǎng)器皿清洗及消毒
4.2 細(xì)胞培養(yǎng)基
4.2.1 水與平衡鹽溶液
4.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)基的基本要求
4.2.3 天然細(xì)胞培養(yǎng)基
4.2.4 合成細(xì)胞培養(yǎng)基
4.2.5 無血清技術(shù)及其培養(yǎng)基
4.2.6 無蛋白培養(yǎng)基與限定化學(xué)成分培養(yǎng)基
4.2.7 其他細(xì)胞培養(yǎng)用液
4.3 細(xì)胞培養(yǎng)的基本方法
4.3.1 培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞生物學(xué)
4.3.2 培養(yǎng)細(xì)胞的生長和增殖
4.3.3 細(xì)胞分離培養(yǎng)技術(shù)
4.3.4 培養(yǎng)物的污染及防止
4.4 常見組織細(xì)胞的培養(yǎng)方法
4.4.1 雞胚成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng)
4.4.2 神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)
4.4.3 外周血淋巴細(xì)胞分離培養(yǎng)
4.5 組織化學(xué)雙光子熒光成像
4.5.1 組織化學(xué)技術(shù)原理與意義
4.5.2 組織化學(xué)研究技術(shù)
4.5.3 組織化學(xué)研究方法
4.5.4 組織化學(xué)技術(shù)的注意事項(xiàng)

第五章 雙光子熒光發(fā)色團(tuán)
5.1 雙光子熒光染料的構(gòu)一效關(guān)系
5.1.1 線性發(fā)色團(tuán)
5.1.2 二維發(fā)色團(tuán)
5.1.3 設(shè)計(jì)策略
5.2 最新進(jìn)展
5.2.1 側(cè)基的引入降低δ值
5.2.2 芴優(yōu)于咔唑作中心基團(tuán)
5.2.3 三嗪八極體的δ值隨支鏈增長而減小
5.2.4 雙色團(tuán)中的乙烯基橋能顯著提高δ值
5.2.5 雙共軛基團(tuán)不宜用作共軛中心
5.2.6 共軛中心宜選用共軛體系大的基團(tuán)
5.2.7 成像宜用分子小而δ值大的染料
5.3 結(jié)論與展望
5.4 參考文獻(xiàn)

第六章 雙光子熒光探針
6.1 雙光子熒光顯微成像的優(yōu)點(diǎn)
6.2 雙光子熒光探針設(shè)計(jì)的一般原理
6.2.1 雙光子熒光探針發(fā)生作用的機(jī)理
6.2.2 雙光子熒光團(tuán)選取的依據(jù)
6.3 雙光子熒光探針的種類及其發(fā)展
6.3.1 雙光子陽離子探針
6.3.2 雙光子陰離子探針
6.3.3 雙光子pH探針
6.3.4 雙光子葡萄糖示蹤器
6.3.5 雙光子脂筏探針
6.3.6 雙光子巰基探針
6.3.7 雙光子半胱氨酸探針
6.3.8 雙光子生物標(biāo)記探針
6.4 結(jié)論與展望
6.5 參考文獻(xiàn)

第七章 開發(fā)及應(yīng)用實(shí)例一：雙光子銀離子探針
7.1 引言
7.2 實(shí)驗(yàn)儀器、試劑及方法
7.3 合成路線的設(shè)計(jì)
7.4 原料的制備
7.5 目標(biāo)化合物的合成[6]
7.6 結(jié)果與討論
7.6.1 探針DAg對金屬陽離子的識(shí)別研究
7.6.2 探針DAg螯合銀離子的研究
7.6.3 探針DAg的雙光子吸收截面
7.6.4 探針DAg對銀離子的核磁滴定
7.6.5 探針DAg用于活細(xì)胞中銀離子的雙光子顯微成像
7.6.6 實(shí)樣銀離子含量的測定
7.7 本章小結(jié)
7.8 核磁圖
7.9 參考文獻(xiàn)

第八章 開發(fā)及應(yīng)用實(shí)例二：雙光子鋅離子探針
8.1 引言
8.2 實(shí)驗(yàn)儀器、試劑及方法
8.3 合成路線的設(shè)計(jì)
8.4 原料的制備
8.5 目標(biāo)化合物（DZn）的合成
8.6 結(jié)果與討論
8.6.1 探針DZn在水中的溶解性
8.6.2 探針DZn對金屬陽離子的識(shí)別研究
8.6.3 探針DZn的雙光子吸收截面
8.6.4 探針DZn對鋅離子的核磁滴定
8.6.5 探針DZn用于活細(xì)胞中鋅離子的雙光子顯微成像
8.6.6 探針DZn的光穩(wěn)定性
8.6.7 探針DZn的細(xì)胞毒性
8.7 本章小結(jié)
8.8 核磁圖
8.9 參考文獻(xiàn)