基礎分子生物學實驗指導

第一章 基因組DNA操作技術
第一節(jié) 基因組DNA的提取
實驗一 SDS法提取小麥葉片DNA
實驗二 動物組織基因組DNA的提取
實驗三 細菌基因組DNA的提取
第二節(jié) DNA質量的檢測
實驗四 核酸的酶切及電泳
第三節(jié) Southern雜交技術
實驗五 小麥基因組DNA的Southern雜交

第二章 質粒操作技術 J7
第一節(jié) 外源基因插入質粒及轉化大腸桿菌
實驗一 外源基因與質粒載體的連接
實驗二 熱擊法轉化質粒
第二節(jié) 質粒的提取及檢測
實驗三 堿裂解法提取大腸桿菌質粒
實驗四 質粒的酶切鑒定

第三章 RNA操作技術
第一節(jié) 總RNA的提取及分析
實驗一 用TRIZOL試劑提取小麥葉片總RNA
實驗二 從冰凍血液中提取總RNA
實驗三 總RNA的變性凝膠電泳
第二節(jié) Northem雜交技術
實驗四 小麥衰老相關蛋白基因的Northern雜交
第三節(jié) cDNA文庫構建及篩選
實驗五 小麥cDNA文庫的構建

第四章 PcR技術與應用
第一節(jié) 普通PCR
實驗一 PCR檢測重組質粒中的插入片段
實驗二 隨機引物擴增多態(tài)DNA（RAPD）
附 用16S rDNA方法鑒定細菌種屬
第二節(jié) 反轉錄PCR
實驗三 反轉錄PCR擴增小麥в-actin基因
第三節(jié) 定時熒光定量PCR
實驗四 定時熒光定量PCR測定小麥中Cu/Zn-SOD基因含量

第五章 電子克隆
實驗一 基于生物信息學克隆水稻過氧化氫酶基因

第六章 蛋白質分離與檢測技術
第一節(jié) SDS-PAGE電泳分離蛋白質
實驗一 SDS-PAGE電泳檢測蛋白質相對分子質量
附 1，5-二磷酸核酮糖羧化酶加氧酶的層析分離與電泳鑒定
第二節(jié) Western雜交技術
實驗二 小麥RuBisCO蛋白的Western雜交
第三節(jié) 等電聚焦電泳
實驗三 小麥過氧化物酶同工酶的等電聚焦分析
第四節(jié) 蛋白質雙向電泳
實驗四 蛋白質雙向電泳檢測小麥葉片蛋白

第七章 外源基因的表達
第一節(jié) 外源基因在大腸桿菌中的表達
實驗一 綠色熒光蛋白基因表達載體的構建
實驗二 綠色熒光蛋白在大腸桿菌中的誘導表達
第二節(jié) 外源基因在枯草桿菌中的表達
實驗三 枯草桿菌電擊轉化（高滲透法）
實驗四 重組載體pHT43-lip在枯草桿菌中的分泌表達
第三節(jié) 外源基因在酵母中的分泌表達
實驗五 綠色熒光蛋白重組表達載體pPIC9K-GFP的構建
實驗六 綠色熒光蛋白在畢赤酵母中的誘導表達

主要參考文獻
附錄
附錄一 常用試劑及緩沖液
附錄二 氨基酸及遺傳密碼
附錄三 常用的相對分子質量標記
附錄四 分子生物學有關網(wǎng)絡資源
附錄五 分子實驗常用儀器設備