分子生物學實驗指導

第一部分基礎(chǔ)實驗1
實驗1質(zhì)粒的提取1
（Ⅰ）堿法1
（Ⅱ）硅石粉法4
實驗2質(zhì)粒DNA瓊脂糖凝膠電泳7
實驗3質(zhì)粒DNA酶切檢查10
實驗4DNA片段的回收12
(Ⅰ)低熔點瓊脂糖法12
(Ⅱ)玻璃奶法14
實驗5DNA片段的體外連接16
實驗6大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備和轉(zhuǎn)化18
實驗7陽性克隆的篩選及鑒定21
實驗8噬菌體的空斑純化23
實驗9噬菌體的制備及效價測定25
實驗10λ噬菌體DNA的小量制備28
實驗11M13噬菌體DNA的制備30
實驗12哺乳動物基因組DNA的制備33
實驗13植物DNA的制備36
實驗14細菌基因組DNA的制備38
實驗15基因組DNA的電泳分析40
實驗16PCR擴增DNA中的引物設(shè)計(Ⅰ)42
PCR擴增DNA中的引物設(shè)計(Ⅱ)46
實驗17PCR擴增DNA的基本反應50
實驗18動物細胞總RNA的快速提取53
實驗19植物細胞總RNA的提取56
實驗20細菌總RNA的提取59
實驗21總RNA的變性瓊脂糖凝膠電泳檢測62
實驗22探針的制備65
實驗23Southern雜交68
實驗24Northern雜交72
實驗25Western吸印76
第二部分綜合性、設(shè)計性實驗80
實驗1克隆并鑒定一個真核單拷貝基因80
實驗2溶藻弧菌外膜蛋白基因OmpU的克隆與原核表達81
第三部分研究性實驗及實驗技術(shù)的應用91
實驗1DNA導入細胞技術(shù)91
實驗2DNA的體外轉(zhuǎn)錄99
實驗3DNA的體外翻譯103
實驗4DNA的定點突變106
實驗5DNA的轉(zhuǎn)錄起始點確定110
實驗6具啟動子活性的DNA序列確定113
實驗7啟動子與調(diào)控蛋白結(jié)合實驗118
實驗8甲基化干擾和足跡實驗122
實驗9RNA的酶保護實驗127
實驗10mRNA代表性差異展示技術(shù)131
實驗11oligo(dT)纖維素色譜法提取poly(A)+RNA134
實驗12基因表達序列分析136
實驗13DNA改組技術(shù)144
實驗14蛋白質(zhì)糖基化及磷酸化研究148
實驗15免疫共沉淀153
實驗16GST pulldown技術(shù)研究蛋白質(zhì)互相作用156
實驗17酵母雙雜交系統(tǒng)釣取與某一蛋白互相作用的蛋白159
實驗18RNA干擾研究蛋白質(zhì)功能167
實驗19染色質(zhì)共沉淀技術(shù)171
實驗20基因敲除實驗175
實驗21基因敲低實驗177
第四部分考研例題及常考的分子生物學實驗技術(shù)179
參考文獻180