降解石油烴產(chǎn)甲烷菌群篩選及應(yīng)用

第1章緒論/001
1.1降解石油烴產(chǎn)甲烷的研究背景002
1.2降解石油烴產(chǎn)甲烷的目的和意義003
1.3降解石油烴產(chǎn)甲烷的國內(nèi)外研究進(jìn)展005
1.3.1降解石油烴產(chǎn)甲烷的功能菌群008
1.3.2影響微生物厭氧降解產(chǎn)甲烷的條件018
1.3.3石油降解的副產(chǎn)物019
1.3.4石油烴厭氧代謝機(jī)理019
1.3.5降解石油烴產(chǎn)甲烷的微生物分析方法021
1.4主要研究內(nèi)容及技術(shù)路線022
1.4.1主要研究內(nèi)容022
1.4.2主要技術(shù)路線023
參考文獻(xiàn)024

第2章降解石油烴產(chǎn)甲烷菌群的初篩/038
2.1主要儀器和試劑043
2.1.1主要儀器043
2.1.2主要試劑043
2.2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和方法045
2.2.1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)045
2.2.2實(shí)驗(yàn)方法048
2.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論054
2.3.1采出液理化性質(zhì)分析054
2.3.2YH5和TH2菌群的初篩055
2.3.3產(chǎn)甲烷前后石油烴的變化060
2.3.4YH5和TH2菌群結(jié)構(gòu)的分析064
2.4本章小結(jié)070
參考文獻(xiàn)071

第3章高效產(chǎn)甲烷菌群的建立/079
3.1主要儀器和試劑085
3.1.1主要儀器085
3.1.2主要試劑086
3.2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和方法087
3.2.1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)087
3.2.2實(shí)驗(yàn)方法089
3.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論090
3.3.1溫度和壓力的模擬系統(tǒng)氣密性和安全性分析090
3.3.2YH5和TH2的配比分析及HYH5的建立092
3.3.3產(chǎn)甲烷菌群HYH5降解石油的分析095
3.3.4溫度和壓力對(duì)HYH5降解石油烴產(chǎn)甲烷的影響100
3.4本章小結(jié)104
參考文獻(xiàn)106

第4章混合菌中單菌鑒定及混合菌培養(yǎng)條件的優(yōu)化/111
4.1主要儀器和試劑112
4.1.1主要儀器112
4.1.2主要試劑112
4.2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和方法112
4.2.1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)112
4.2.2實(shí)驗(yàn)方法114
4.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論117
4.3.1HYH5和YHH6混合菌群中單菌的分離鑒定117
4.3.2接種量對(duì)HYH5菌群的影響126
4.3.3初始pH值對(duì)HYH5菌群的影響126
4.3.4初始鹽度對(duì)HYH5菌群的影響127
4.3.5石油濃度對(duì)HYH5菌群的影響127
4.3.6采油劑聚丙烯酰胺對(duì)HYH5菌群的影響128
4.4本章小結(jié)129
參考文獻(xiàn)131

第5章生長激活劑對(duì)菌群產(chǎn)甲烷的影響/133
5.1主要儀器和試劑134
5.1.1主要儀器134
5.1.2主要試劑134
5.2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和方法135
5.2.1不同表面活性劑對(duì)HYH5混合菌群產(chǎn)甲烷的影響135
5.2.2不同碳源對(duì)HYH5菌群產(chǎn)甲烷的影響135
5.2.3鉬離子和鋅離子對(duì)HYH5菌群產(chǎn)甲烷的影響136
5.2.4硫酸根和硝酸根電子受體對(duì)HYH5菌群產(chǎn)甲烷的影響136
5.2.5YHH6副產(chǎn)物對(duì)HYH5菌群產(chǎn)甲烷影響137
5.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論138
5.3.1不同表面活性劑對(duì)HYH5混合菌群產(chǎn)甲烷的影響138
5.3.2不同碳源對(duì)HYH5菌群產(chǎn)甲烷的影響139
5.3.3鉬離子和鋅離子對(duì)HYH5菌群產(chǎn)甲烷的影響140
5.3.4硫酸根和硝酸根電子受體對(duì)HYH5菌群產(chǎn)甲烷的影響140
5.3.5紅外光譜和高效液相色譜分析YHH6副產(chǎn)物142
5.3.6YHH6副產(chǎn)物對(duì)HYH5菌群產(chǎn)甲烷的影響143
5.4HYH5厭氧產(chǎn)甲烷菌群的應(yīng)用144
5.5本章小結(jié)145
參考文獻(xiàn)146

第6章降解石油烴產(chǎn)甲烷的機(jī)理初探/149
6.1主要儀器和試劑151
6.1.1主要儀器151
6.1.2主要試劑151
6.2實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和方法151
6.2.1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)151
6.2.2實(shí)驗(yàn)方法152
6.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論153
6.3.1HYH5菌群降解同位素標(biāo)記的甲苯153
6.3.2HYH5菌群降解鏈烴的分析157
6.4本章小結(jié)158
參考文獻(xiàn)158

第7章結(jié)論及展望/160
7.1結(jié)論161
7.2展望162

附錄/164
附錄1：紫外分光光度法測(cè)定采出水中總氮165
附錄2：DNA提取儀器設(shè)備168
附錄3：DNA提取步驟168
附錄4：DGGE標(biāo)準(zhǔn)操作方法169
附錄5：降解菌的生理生化特性實(shí)驗(yàn)170
附錄6：細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒使用方法172
附錄7：基因組DNA及PCR產(chǎn)物瓊脂糖電泳174
附錄8：原油四組分分離方法175