食品微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)

第一部分食品微生物學(xué)基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)/1
一、無(wú)菌概念和無(wú)菌操作技術(shù)1
實(shí)驗(yàn)1實(shí)驗(yàn)室環(huán)境要求1
實(shí)驗(yàn)2無(wú)菌操作技術(shù)5

二、培養(yǎng)基的制備與滅菌方法8
實(shí)驗(yàn)3玻璃器皿的洗滌及包扎8
實(shí)驗(yàn)4培養(yǎng)基的制備10
實(shí)驗(yàn)5干熱滅菌12
實(shí)驗(yàn)6高壓蒸汽滅菌14
實(shí)驗(yàn)7紫外線(xiàn)滅菌15
實(shí)驗(yàn)8微孔濾膜過(guò)濾除菌16

三、顯微鏡及顯微技術(shù)17
實(shí)驗(yàn)9普通光學(xué)顯微鏡17
實(shí)驗(yàn)10相差顯微鏡的使用20
實(shí)驗(yàn)11暗視野光學(xué)顯微鏡的使用21
實(shí)驗(yàn)12熒光顯微鏡的使用22

四、微生物的染色、形態(tài)及結(jié)構(gòu)觀察24
實(shí)驗(yàn)13細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色法24
實(shí)驗(yàn)14革蘭氏染色法26
實(shí)驗(yàn)15細(xì)菌的芽孢染色29
實(shí)驗(yàn)16莢膜染色31
實(shí)驗(yàn)17鞭毛染色33
實(shí)驗(yàn)18放線(xiàn)菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察34
實(shí)驗(yàn)19酵母菌細(xì)胞的死活鑒別及形態(tài)觀察36
實(shí)驗(yàn)20霉菌的形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察37
實(shí)驗(yàn)21微生物細(xì)胞大小的測(cè)量39

五、微生物的純培養(yǎng)41
實(shí)驗(yàn)22微生物的分離、純化與接種技術(shù)41
實(shí)驗(yàn)23厭氧微生物的培養(yǎng)44
實(shí)驗(yàn)24病毒的培養(yǎng)45
實(shí)驗(yàn)25食用真菌的培養(yǎng)47

六、微生物數(shù)量的測(cè)定50
實(shí)驗(yàn)26郝氏霉菌計(jì)數(shù)法50
實(shí)驗(yàn)27血細(xì)胞計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)法測(cè)定微生物生長(zhǎng)及酵母發(fā)芽率51
實(shí)驗(yàn)28平板計(jì)數(shù)法54
實(shí)驗(yàn)29光電比濁計(jì)數(shù)法56
實(shí)驗(yàn)30單細(xì)胞微生物生長(zhǎng)曲線(xiàn)的制作58
實(shí)驗(yàn)31噬菌體效價(jià)的測(cè)定60

七、環(huán)境因素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響61
實(shí)驗(yàn)32化學(xué)因素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響61
實(shí)驗(yàn)33紫外線(xiàn)對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響63
實(shí)驗(yàn)34溫度對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響64
實(shí)驗(yàn)35滲透壓及pH對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響68
實(shí)驗(yàn)36抑菌劑對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響70

八、微生物對(duì)含碳化合物的分解和利用73
實(shí)驗(yàn)37唯一碳源實(shí)驗(yàn)73
實(shí)驗(yàn)38糖、醇、糖苷類(lèi)碳源的分解實(shí)驗(yàn)74
實(shí)驗(yàn)39淀粉水解實(shí)驗(yàn)75
實(shí)驗(yàn)40纖維素水解實(shí)驗(yàn)76
實(shí)驗(yàn)41果膠分解實(shí)驗(yàn)77
實(shí)驗(yàn)42油脂水解實(shí)驗(yàn)78
實(shí)驗(yàn)43甲基紅（M.R.）實(shí)驗(yàn)78
實(shí)驗(yàn)44乙酰甲基甲醇實(shí)驗(yàn)79
實(shí)驗(yàn)45檸檬酸鹽實(shí)驗(yàn)80

九、微生物對(duì)含氮化合物的分解和利用81
實(shí)驗(yàn)46氮源同化實(shí)驗(yàn)81
實(shí)驗(yàn)47明膠液化實(shí)驗(yàn)82
實(shí)驗(yàn)48石蕊牛乳實(shí)驗(yàn)83
實(shí)驗(yàn)49尿素實(shí)驗(yàn)84
實(shí)驗(yàn)50產(chǎn)硫化氫實(shí)驗(yàn)84
實(shí)驗(yàn)51吲哚實(shí)驗(yàn)85
實(shí)驗(yàn)52過(guò)氧化氫酶實(shí)驗(yàn)86

十、微生物基因突變及基因轉(zhuǎn)移87
實(shí)驗(yàn)53微生物的誘發(fā)突變87
實(shí)驗(yàn)54細(xì)菌的接合作用90
實(shí)驗(yàn)55Ames致突變和致癌試驗(yàn)91

十一、微生物的菌種保藏、復(fù)壯及育種技術(shù)94
實(shí)驗(yàn)56微生物的菌種保藏技術(shù)95
實(shí)驗(yàn)57微生物菌種的復(fù)壯技術(shù)99
實(shí)驗(yàn)58微生物的人工誘變育種技術(shù)101

十二、分子微生物學(xué)基礎(chǔ)技術(shù)操作114
實(shí)驗(yàn)59聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)體外擴(kuò)增DNA114
實(shí)驗(yàn)60核酸電泳和瓊脂糖凝膠中DNA的回收117
實(shí)驗(yàn)61PCR產(chǎn)物的克隆和質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌及其檢測(cè)119
實(shí)驗(yàn)62氯化鈣法制備大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞121
實(shí)驗(yàn)63大腸桿菌的電擊轉(zhuǎn)化123
實(shí)驗(yàn)64用異丙基硫代半乳糖苷（IPTG）誘導(dǎo)啟動(dòng)子在大腸桿菌中表達(dá)克隆基因124
實(shí)驗(yàn)65細(xì)菌DNA(G＋C)摩爾分?jǐn)?shù)的測(cè)定126
實(shí)驗(yàn)6616S rRNA序列分析及其同源性分析128
實(shí)驗(yàn)67細(xì)菌原生質(zhì)體的融合131

十三、免疫學(xué)技術(shù)134
實(shí)驗(yàn)68抗原與免疫血清的制備134
實(shí)驗(yàn)69細(xì)菌的凝集實(shí)驗(yàn)136
實(shí)驗(yàn)70雙向免疫擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)139
實(shí)驗(yàn)71酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)140
實(shí)驗(yàn)72蛋白質(zhì)印跡法142
實(shí)驗(yàn)73熒光抗體技術(shù)144

第二部分食品微生物學(xué)綜合應(yīng)用實(shí)驗(yàn)技術(shù)/146
實(shí)驗(yàn)74菌落總數(shù)的測(cè)定146
實(shí)驗(yàn)75水的大腸菌群（M.R.N.）檢驗(yàn)148
實(shí)驗(yàn)76鮮牛乳自然發(fā)酵過(guò)程中微生物菌相變化測(cè)定151
實(shí)驗(yàn)77甜酒釀的制作153
實(shí)驗(yàn)78產(chǎn)蛋白酶菌株的篩選154
實(shí)驗(yàn)79食品微生物實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中的微生物檢測(cè)156

附錄/159
附錄Ⅰ大腸桿菌最可能數(shù)(MPN)檢索表159
附錄Ⅱ常用培養(yǎng)基配方159
附錄Ⅲ常用染色液的配制184
附錄Ⅳ用Mega 4構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)的過(guò)程185

參考文獻(xiàn)/196