生物工程基礎(chǔ)實驗

第一章 常用儀器設(shè)備及使用  001
一、PCR 儀的原理及使用方法  001
二、臺式離心機的使用  003
三、分光光度計原理及使用  005
四、自動核酸蛋白分離色譜儀  008
五、電泳儀的使用  011
六、凝膠成像系統(tǒng)的使用  017
七、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器的使用  018
八、索氏提取器  020
九、微波-超聲波合成萃取儀  021
十、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀  023
十一、BT 系列蠕動泵  025
第二章 生物化學實驗  028
實驗一 甲醛滴定法  028
實驗二 糖的定量：3,5-二硝基水楊酸比色法  030
實驗三 植物組織中可溶性總糖的測定  033
實驗四 血清蛋白的醋酸纖維薄膜電泳  035
實驗五 蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)  037
實驗六 肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力測定  038
實驗七 維生素C 的定量測定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）  041
實驗八 粗脂肪提取和含量測定  043
實驗九 動物組織中脫氧核糖核酸的制備及測定  045
第三章 分子生物學實驗  048
實驗一 DNA 的瓊脂糖凝膠電泳  048
實驗二 紫外分光光度法分析DNA 濃度與純度  050
實驗三 CTAB 法提取植物基因組DNA  052
實驗四 SDS 法提取植物基因組 DNA  053
實驗五 大腸桿菌基因組DNA 的提取  055
實驗六 綠色熒光蛋白基因的PCR 擴增  057
實驗七 硅膠膜吸附法純化DNA 片段  060
第四章 基因工程實驗  062
實驗一 質(zhì)粒DNA 的提取與檢測  062
實驗二 質(zhì)粒DNA 的酶切反應(yīng)  067
實驗三 瓊脂糖凝膠電泳回收DNA 片段  070
實驗四 目的DNA 片段與載體的連接反應(yīng)  072
實驗五 大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備  076
實驗六 大腸桿菌感受態(tài)細胞的轉(zhuǎn)化  079
實驗七 陽性克隆的篩選和鑒定  082
實驗八 外源基因在大腸桿菌中的誘導(dǎo)表達  085
實驗九 SDS-PAGE 檢測表達蛋白  089
第五章 酶與蛋白質(zhì)工程實驗  094
實驗一 過氧化氫酶活性的測定  094
實驗二 淀粉酶的提取和活性測定  096
實驗三 膽綠素還原酶的修飾與活性基團鑒定  099
實驗四 殼聚糖微球固定化木瓜蛋白酶  100
實驗五 溶菌酶的制備及活力測定  103
實驗六 酶法澄清蘋果汁加工工藝優(yōu)化  105
實驗七 酵母細胞固定化  106
實驗八 pH 對酶活力的影響——最適pH 的測定  108
實驗九 溫度對酶活力的影響——最適溫度的測定  110
實驗十 酵母中蔗糖酶的提取及活性測定  112
第六章 發(fā)酵工程實驗  115
實驗一 自然界中發(fā)酵菌株的分離  115
實驗二 淀粉酶發(fā)酵菌種的初篩  117
實驗三 液化型淀粉酶活力的測定  118
實驗四 液化型淀粉酶發(fā)酵菌種的紫外誘變育種  121
實驗五 發(fā)酵菌種的復(fù)壯和保藏  122
實驗六 正交實驗法優(yōu)化生產(chǎn)菌株發(fā)酵培養(yǎng)基的配方  124
實驗七 生長曲線和產(chǎn)物形成曲線的測定  126
第七章 生物分離工程實驗  129
實驗一 牛乳中酪蛋白的提取及含量測定  129
實驗二 維生素A 的提取及含量測定  132
實驗三 大蒜細胞SOD 酶的提取與分離  136
實驗四 香菇多糖的提取、純化及含量測定  141
實驗五 離子交換樹脂總交換容量的測定  143
實驗六 離子交換柱色譜分離混合氨基酸  148
實驗七 PEG/硫酸鹽雙水相系統(tǒng)相圖制作  152
實驗八 PEG/(NH4)2SO4 系統(tǒng)中蛋白質(zhì)分配系數(shù)測定  154
實驗九 胰蛋白酶的提取與激活  158
實驗十 胰蛋白酶的酶活和比活測定  161
實驗十一 反膠束萃取技術(shù)提取胰蛋白酶  164
附錄一 常用堿基符號  168
附錄二 常用氨基酸符號  169
附錄三 常用緩沖液的配制  170
附錄四 常用上樣緩沖液配制  173
附錄五 常用電泳緩沖液的配制  174
附錄六 常用試劑的配制  175
附錄七 常用緩沖液母液或儲存液  178
附錄八 常用抗生素  179
附錄九 硫酸銨飽和度計算及加入方式  180
參考文獻  182