毛伯溫，字汝厲，江西吉水人。祖父毛超，做過廣西知府。伯溫考中正德三年(1508)進士，初任紹興府推官，后升任御史，先后巡按福建、河南。世宗即位后，宦官張銳、張忠等被判死刑，他們的同伙蕭敬、韋靈暗中想拖延行刑。伯溫上書請一并殺了蕭敬、韋靈，宦官們因此才閉上了嘴巴。

　　嘉靖初年，伯溫升為大理寺丞。后來又升為右僉都御史，巡撫寧夏。李福達一案被重新提起，伯溫因為在大理寺時誤判重罪，被罷官歸鄉(xiāng)。后來因為他人推薦恢復舊職，讓他巡撫山西，又改為巡撫順天，他都沒有上任。朝廷于是讓他改為辦理都察院的事務，提升他為左副都御史。在這個職務上，他又受到趙王府的族人朱..椋的攻擊，被解除官職聽候考察。過后又被開除了職務。

　　十五年(1536)冬天，皇子出生，打算向外國頒布詔書。禮部尚書夏言認為安南多年不來朝貢，不應當派遣使節(jié)，并進而請討伐它。世宗于是起用伯溫為右都御史，讓他和咸寧侯仇鸞整兵待命。伯溫以父喪在身推辭，世宗不答應。第二年五月伯溫到達京城，遞上六條方略。恰好這時安南國王孫黎寧派遣陪臣鄭惟僚等人來訴說莫登庸弒君篡權，請中國興兵替他們復仇。世宗懷疑情況不真實，命令伯溫暫緩出兵，傳令兩廣、云南守臣調查以后報上來，同時讓伯溫協(xié)助辦理都察院的事務。御史何維柏奏請讓伯溫守完喪，世宗不答應。伯溫只好稱病不出，一直到除喪服的祭祀過后才出來理事。這年冬天，伯溫升任工部尚書。

　　十七年春天，黔國公沐朝輔等拿登庸的降表獻給朝廷，請寬恕他的罪，允許安南來朝貢。在此之前，云南巡撫汪文盛奏稱，登庸聽說朝廷將發(fā)兵前往討伐他，派人偷偷來偵察我們。世宗已傳令要大臣按照以前的詔書出兵，文盛又采納安南投降過來的武文淵的計策，上書說登庸可以拿下來的情況，一面又傳檄要登庸向朝廷上表獻地。到這個時候，世宗把朝輔的奏章交給大臣們討論，大家都說不能答應他。世宗于是改命伯溫擔任兵部尚書兼右都御史，限期上任。世宗認為用兵的事關系重大，并沒有非討伐安南不可的意思，只是想威嚇制服它而已?？墒潜可袝鴱埈憶]有什么主見，完全視世宗的意思為可否。朝中大臣們多認為不該興兵討伐，只是不敢明白地諫阻。世宗的指示傳下去幾個月后，兩廣總督、侍郎張經(jīng)遞上一份用兵方略，并且說需要三十萬士兵，一百六十萬石糧餉。欽州知州林希元則極力說登庸不難拿下來，請立即出兵。張瓚不敢做決定，又奏請讓大臣們公議。討論過后遞上去的決議又沒有什么像樣的計策，世宗感到不高興，責怪了張瓚一番，軍隊又停止出征了。伯溫受命再次協(xié)助辦理按察院的事務。

　　第二年二月，世宗住在承天，詔令伯溫去總督宣府、大同、山西的軍務。不久選用東宮官員，又給他加官，兼任太子賓客。大同所管轄的鎮(zhèn)邊、鎮(zhèn)川、弘賜、鎮(zhèn)河、鎮(zhèn)虜五座城堡，距城二百多里遠，是接近敵人營帳的最邊遠地帶。自從巡撫張文錦因為修筑這些城堡導致兵變后，沒有人敢再主張維修它們了。伯溫說：“兵變所以發(fā)生，是因為文錦用人不當，并不是他的建議有什么不對?！苯K于還是修復了這些城堡，招募三千士兵在這里防守，分給他們空閑的田地，永久地免除他們的田賦。邊防依仗這一點很有威力。論功，伯溫被晉升為太子少保。

　　這時，登庸害怕中國討伐他，幾次上書請求投降。世宗也想借此機會安撫他，就派侍郎黃綰去招安。黃綰過多地提出各種要求，世宗惱了，罷了黃綰的官。然后又下交群臣議論，大家都說應當討伐他。世宗同意了，就在閏七月里命令伯溫、仇鸞南征，文武三品以下官員不聽命令的，允許他們按軍法處治。伯溫等到達廣西后，召集總督張經(jīng)，總兵官、安遠侯柳王旬，參政翁萬達、張岳等商定，征調兩廣、福建、湖廣狼土官兵共十二萬五千多人，分置三處哨所，從憑祥、龍峒、思陵州挺進安南，再用兩支奇軍作為聲援部隊。又傳令云南巡撫汪文盛率兵駐在蓮花灘，也分兵三路進軍安南。部署已定，碰上仇鸞因罪被召回，就讓柳王旬取代了他。嘉靖十九年(1540)秋天，伯溫等人進駐南寧，傳檄安南臣民，告訴他們大明王朝要復興被登庸無理毀滅的國家，選擇黎氏子孫繼承祖宗的家國，只治登庸父子的罪，有帶領郡縣投降的，就拿這個郡縣封賞他。又懸重賞緝拿登庸父子，同時傳令登庸只要交上土地、人民的簿冊并依此納款，就照詔書中講過的那些饒恕他的罪過。登庸非常害怕，派了使臣到萬達那里求降，措辭很是可憐。萬達把他們送到伯溫那里。伯溫奉命答應了，向他們傳達了天子的恩德和威嚴，收取了安南國的地圖、戶籍，還有他們所歸還的欽州四峒地區(qū)，暫且命令登庸的使臣回國聽令。伯溫把這些情況飛章上奏，世宗極為高興，發(fā)布詔書把安南國改名安南都統(tǒng)使司，讓登庸當都統(tǒng)使，世代相承，在境內分設十三個宣撫司，由他自己安排。伯溫接受討伐安南的任務一年多時間里，沒射過一支箭，安南就被平定，這是因為世宗本來就不打算動兵的緣故。事后論功，伯溫被加官為太子太保。

　　二十一年(1542)正月伯溫回朝，仍舊辦理都察院的職事。邊關上幾次傳來警報，伯溫請修建京師外城。世宗已批示說可以，給事中劉養(yǎng)直說修廟的工程正在進展中，物力跟不上，世宗就傳令暫停修筑外城。當年十月，張瓚死了，伯溫就代理兵部的事務。張瓚為人迷戀權柄，不能盡職，在兵部當了八年尚書，軍事設施全給荒廢了。伯溫召集朝臣們商議后奏上二十四條防邊建議，軍令為之一新。有言官建議核實新軍、京軍及內府力士、工匠名額，以便節(jié)約開支，充實國庫儲備。伯溫于是遞上關于應當裁減的冗濫人員的二十多條意見，舉凡錦衣、騰驤等衛(wèi)，御馬、內官、尚膳等監(jiān)，這些一向被宦官們占據(jù)的部門，都在裁減之列。世宗稱贊這個建議，命令立即照此清理。朝廷中多年來存在的這些弊端得到了很大改善，可是世宗身邊的太監(jiān)們這下卻很不高興。

　　二十三年(1544)秋天，順天巡撫朱方因為防秋結束請撤回臨時派駐的客兵。不多久，北寇大舉入侵，直逼京師近郊。世宗大為震怒，一并逮捕了總督翟鵬，讓他充了軍，把朱方打死在大棍之下。御史舒汀說，朱方只是建議撤回薊鎮(zhèn)的客兵，主張把宣府、大同的客兵一起撤回的是伯溫和職方郎韓最。世宗于是把伯溫削除官籍，把韓最打了八十大棍，發(fā)配到最邊遠的地方充軍去了。伯溫回鄉(xiāng)以后，背上長出疽瘡死掉了。穆宗即位后，給他恢復了官職，并賜予恤典。天啟初年，追謚他為“襄懋”。

　　伯溫為人氣宇深沉、堅強，吃飯、飲酒有十個人的容量。遇事決策，不動聲色。在對安南的戰(zhàn)爭中，萬達、張岳提出了很多計策。伯溫極力向朝廷推薦他們，他們兩個于是得到了任用。